Особенности фармакокинетики 7-о-гентиобиозида формононетина определяют его гемостатическую активность у крыс

УДК 615.322:616-005.1-08:611.018.52:591.6-092.4

Аннотация

Цели исследования: 1. изучить сравнительное влияние 7-О-гентиобиозида формононетина (ГБФ) из корней M. amurensis на показатели тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза в условиях длительного энтерального и внутрибрю- шинного введения крысам; 2. определить продукты метаболизма ГБФ в крови и моче крыс в условиях энтерально- го и внутрибрюшинного введения.

Материалы и методы. Исследование выполнено на самцах крыс Wistar массой 220–280 г. В первой серии экспери- ментов животные на протяжении 10 дней получали ГБФ энтерально и внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг. По окончании периода введения определяли АДФ-стимулируемую агрегацию тромбоцитов, значения активированного парциаль- ного тромбопластинового времени, протромбинового времени, тромбинового времени, содержание фибриногена, растворимых фибрин-мономерных комплексов, активность антитромбина III. Для интегрального анализа системы ге- мостаза применяли тромбоэластометрию. Во второй серии экспериментов ГБФ вводили внутрь 6 животным (1 груп- па) в дозе 150 мг/кг. Отбирали кровь через 2 и 4 часа после введения ГБФ, собирали мочу за 8 часов после введения ГБФ. У 6 животных (2 группа) производили те же манипуляции после внутрибрюшинного введения ГБФ в такой же дозе. Осуществляли специальную подготовку взятых проб для хроматомасс-спектрометрического анализа; получен- ные фракции анализировали на хроматомасс-спектрометре Shimadzu HPLC–PDA–MS. Масс-спектры регистрировали с использованием метода электрораспылительной ионизации в режиме положительных и отрицательных ионов (1,50 кВ) в диапазоне m/z 100–800. Полученные результаты обрабатывали статистическим методом вариационных рядов с использованием критерия Манна-Уитни.

Результаты. Изофлавоноид ГБФ оказывал существенное влияние на процессы тромбоцитарного и коагуляционно- го гемостаза у крыс при его энтеральном введении, т. е. в условиях попадания ГБФ в желудочно-кишечный тракт, ин- гибируя процессы агрегации тромбоцитов и свертывания крови. Было зафиксировано почти 10-кратное снижение АДФ-агрегации по сравнению с показателями контрольных животных. При исследовании коагуляционного гемоста- за энтеральное применение ГБФ сопровождалось отчетливым и глубоким сдвигом основных учитываемых хрономе- трических показателей. Принципиально иная картина наблюдалась при внутрибрюшинном введении ГБФ: его угне- тающего влияния на гемостаз обнаружено не было. Определены основные этапы метаболизма ГБФ у крыс в услови- ях энтерального применения. Установлены продукты биотрансформации изученного изофлавоноида, происходящей в кишечнике крыс.

Заключение. 1. В экспериментах на крысах впервые выявлена способность изофлавоноида ГБФ, выделенного из кор- ней M. amurensis, ингибировать ряд показателей тромбоцитарного и коагуляционного гемостаза в условиях энте- рального, но не внутрибрюшинного введения. Этот факт имеет важное практическое значение, поскольку открывает перспективу создания нового перорального лекарственного средства, способного уменьшить вероятность возник- новения тромбозов при различных сердечно-сосудистых заболеваниях. 2. Определены основные этапы метаболиз- ма ГБФ у крыс, влияющие на его биодоступность в условиях энтерального применения. 3. Биологическая активность изученного изофлавоноида у крыс обусловлена его биотрансформацией в формононетин, даидзеин и другие про- дукты метаболизма, образующиеся под воздействием кишечной микробиоты животных.

ЛИТЕРАТУРА

1. Плотников Т.М., Анищенко А.М., Плотников М.Б. Фитоэстро- гены: механизмы коррекции сердечно-сосудистых осложне- ний. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2017; 80 (1): 39–44.
2. Anishcenko A.M. Hemoreological effects of complex isoflavo- noid preparation in ovariectomized rats. Bull Exp Biol Med. 2013; 154 (6): 755–7.
3. Jacques P.F., Cassidy A., Peterson J.J., Dwyer J.T. Dietary flavo- noid intakes and CVD incidence in the Framingham Offspring Cohort. Br J Nutr. 2015; 114 (9): 1496–503.
4. Кулеш Н.И., Федореев С.А., Веселова М.В. и др. Влияние изо- флавоноидов из корней Maackia amurensis на метаболические реакции печени при экспериментальном токсическом гепа- тите. Химико-фармацевтический журнал. 2016; 50 (7): 21–7.

1. Kulesh N.I., Fedoreyev S.A., Veselova M.V. et al. Antioxidant activ- ity of the isoflavonoids from the roots of Maackia amurensis. Nat Prod Comm. 2013; 8 (5): 589–92.

2. Thilakarathna S.H., Rupasinghe H.P.V. Flavonoid bioavailabili- ty and attempts for bioavailability enhancement. Nutrients. 2013; 5: 3367–87.

3. Marin L., Miguelez E.M., Villar C.J., Lombo F. Bioavailability of dietary polyphenols and gut microbiota metabolism: Anti- microbial properties. BioMed Res Int. 2015; 2015: 905215. DOI: 10.1155.2015/905215.

4. Макарова М.Н. Биодоступность и метаболизм флавоноидов. Вопросы питания. 2011; 80 (3): 4–12.

5. Kroon P.A., Clifford M.N., Crozier A. et al. How should we assess the effects of exposure to dietary polyphenols in vitro? Am J Clin Nutr. 2004; 8: 15–21.

6. Shelnutt S.R., Cimino C.O., Wiggins P.A. et al. Pharmacokinetics of the glucuronide and sulfate conjugates of genistein and daidze- in in men and women after consumption of a soy beverage. Am J Clin Nutr. 2002; 76: 588–94.

7. Замятина С. В., Зверев Я. Ф., Момот А. П. и др. Влияние 7-О-гентиобиозида формононетина на показатели тромбо- цитарного гемостаза у крыс. Тромбоз, гемостаз и реология. 2016; 2: 55–8.

8. Замятина С. В., Зверев Я. Ф., Момот А. П. и др. Влияние 7-О-гентиобиозида формононетина на показатели коагуля- ционного гемостаза и фибринолиз у крыс. Тромбоз, гемостаз и реология. 2016; 3: 73–6.

9. Момот А.П. Патология гемостаза. Принципы и алгоритмы клинико-лабораторной диагностики. СПб.: ФормаТ. 2006: 208 с.

10. Авдушкина Л.А., Вавилова Т.В., Зыбина Н.Н. Метод тромбо- эластографии/тромбоэластометрии в оценке системы гемо- стаза: прошлое и настоящее. Референтные пределы. Клини- ко-лабораторный консилиум. 2009; 5: 26–33.

11. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. М.: Ньюдиамед. 2008: 292 с.

12. Долгов В.В., Свирин П.Н. Лабораторная диагностика нару- шений гемостаза. М.-Тверь: Триада. 2005: 227 с.

13. Fuentes E., Palomo I. Antiplatelet effects of natural bioactive com- pounds by multiple targets: Food and drug interactions. J Funct Foods. 2014; 6: 73–81.

14. Karlíčkova J., Říha M., Filipský T. et al. Antiplatelet effects of flavo- noids mediated by inhibition of arachidonic acid based pathway. Published online. Planta med © Georg Thieme Verlag KG, Stutt- gart, New York. 2015. DOI: 10.1055/s-0035–1557902.

15. Navarro-Nuсez L., Lozano M.L., Palomo M. et al. Apigenin inhib- its platelet adhesion and thrombus formation and synergizes with aspirin in the suppression of the arachidonic acid pathway. J Agric Food Chem. 2008; 56 (9): 2970–6.

16. Navarro-Nuсez L., CastilloJ., Lozano M.L. et al. Thromboxane A2 receptor antagonism by flavonoids: structure-activity relationships. J Agric Food Chem. 2009; 57 (4): 1589–94.

17. Correia-da-Silva M., Susa E., Duarte B. et al. Flavonoids with an oligopolysulfated moiety: a new class of anticoagulant agents. J Med Chem. 2011; 54 (1): 95–106.

18. Bijak M., Ponczek M.B., Nowak P. Polyphenol compounds belong- ing to flavonoids inhibit activity of coagulation factor X. J Biol Mac- romol. 2014; 65: 129–35.