Градиентная эктацитометрия — объективный метод оценки детерминант деформационных свойств эритроцитов.

УДК 612.117

Аннотация

Резюме. Введение. Деформационная способность эритроцитов детерминируется степенью гидратированности гемоглобина, вязкостными свойствами мембраны и удельной поверхностью красной клетки крови. Для оценки функциональных свойств эритроцитов с успехом используется метод осмотической градиентной эктацитометрии. Цель исследования: предложить дополнительные параметры оценки реологических свойств эритроцитов и способы их измерения. Материалы и методы. Эксперименты выполнены на эритроцитах крови 5 крыс линии Вистар. Деформационные свойства эритроцитов изучали на экспериментальной лабораторной установке методом градиентной эктацитометрии. Предпринято изучение индекса удлинения эритроцитов. Увеличение модуля сдвига мембраны вызывали обработкой эритроцитов бифункциональным сульфгидрилокисляющим реагентом — диамидом. Использовали концентрации диамида в цельной крови в диапазоне 0,01–0,5 ммоль/л. Результаты. Профили осмотической деформируемости эритроцитов, регистрируемые при высоком напряжении сдвига (τ = 10,5 Н/м2), начинают заметно изменяться только с концентрации диамида в 0,01 ммоль/л. При низком напряжении сдвига (τ=1,0 Н/м2) снижение гибкости мембраны эритроцитов было обнаружено по уменьшенной дефор- мации уже при концентрации диамида в 0,02 ммоль/л. Заключение. Обосновано дополнение спектра сертифицированных возможностей метода осмотической градиентной эктацитометрии по оценке детерминант деформационных свойств красных клеток крови тремя новыми показателями, а именно: осмотического деформационного диапазона, пассивной водной проницаемости и микровязкости мембран. Измерение при низком напряжении сдвига позволяет оценивать полиморфизм эритроцитов периферической крови по морфологическим признакам (анизоцитоз). Предлагаемые показатели существенно расширяют диагностический потенциал метода градиентной эктацитометрии.

Литература

1. Vent-Schmidt J., Waltz X., Pichon A. et al. Indirect viscosimetric method is less accurate than ektacytometry for the measurement of red blood cell deformability. Clin Hemorheol Microcirc. 2015;59(2):115–21. DOI: 10.3233/CH-131727. 2. Mohandas N., Clark M. R., Jacobs M. S., Shohet S. B. Analysis of factors regulating erythrocyte deformability. J Clin Invest. 1980;66(3):563–73. DOI: 10.1172/JCI109888. 3. Liu X., Tang Zhi-yu, Zeng Zh. et al. The measurement of shear modulus and membrane surface viscosity of RBC membrane with ektacytometry: a new technique. Mathematical Biosciences. 2007;209(1):190–204. DOI: 10.1016/j.mbs.2006.09.026. 4. Johnson R.M. Ektacytometry of red blood cells. Meth Enzymol. 1989;173:35–54. DOI: 10.1016/s0076–6879(89)73004–4. 5. Fischer T. M., Haest C. W., Stöhr M. et al. Selective alteration of erythrocyte deformabiliby by SH-reagents: evidence for an involvement of spectrin in membrane shear elasticity. Biochim Biophys Acta. 1978;510(2):270–82. DOI: 10.1016/0005– 2736(78)90027–5. 6. Clark M.R., Mohandas N., Shohet S.B. Osmotic gradient ektacytometry: comprehensive characterization of red cell volume and surface maintenance. Blood. 1983;61(5):899–910. PMID: 6831052. 7. Viallat A., Abkarian M. Red blood cell: from its mechanics to its motion in shear flow. Int Jnl Lab Hem. 2014;36(3):237–43. DOI: 10.1111/ijlh.12233. 8. Katiukhin L.N. A method for evaluation of membrane permeability for water by the erythrocyte osmotic deformability profiles. Bull Exp Biol and Med. 2014;157(1):116–8. DOI: 10.1007/s10517– 014–2505–1. 9. Nash G.B., Meiselman H.J. Alteration of red cell membrane viscoelasticity by heart treatment: effect on cell deformability and suspension viscosity. Biorheology. 1985;22(1):73–84. DOI: 103233/ bir-1985–22106. 10. Clarke G.M., Higgins T.N. Laboratory investigation of hemoglobinopathies and thalassemias: review and update. Clin Chem. 2000;46(8):1284–90. PMID: 10926923. 11. Haest C.W., Fischer T.M., Plasa G., Deuticke B. Stabilization of erythrocyte shape by a chemical increase in membrane shear stiffness. Blood Cells. 1980;6(3):539–53. PMID: 7397401. 12. Катюхин Л.Н. Деформационные кривые как оценка вогнутости эритроцита. В мире научных открытий. 2014;(2):394–9.